最近很多人问我关于胚胎的一些问题,我就干脆逮住了诊所的胚胎实验室主任——Dr. Carlos.Guerrero,做了一个专访!给大家全面介绍一下关于胚胎的知识和常见问题。
Dr. Guerrero是咱达村胚胎学家协会创始人兼CEO,在诊所(Fertility Specialist of Texas)建立了自己独立的胚胎实验室团队。这个团队主要是由高级胚胎学家(Senior Embryologist),初级胚胎学家(Junior Embryologist),男科学家(Andrologist)组建。除了圣诞节,实验室24小时都会有人工作,负责操作卵子和精子,培育健康的胚胎。
Part 1 取卵后都发生了什么
在取卵之后,患者的卵子将立刻被送到与手术室一墙之隔的胚胎实验室内,由胚胎学家接手。接下来会发生什么呢?
1. 清洗卵子和精子
胚胎学家会立刻对卵子进行清理,统计出一共取得了多少颗卵子并在患者麻醉醒来后告知患者夫妇。
与此同时,丈夫需提交新鲜采集的精子。如有特殊情况,例如男方无法到场,或是使用的捐赠精子,我们会在这时解冻提前冷冻好的精子。
新鲜的精液送达实验室后,我们的工作人员会使用特殊的媒介将精液进行洗涤,以取得最强壮的精子。
以下是三种常用的精子清洗技术。
a. 简单精子洗涤法
将精液与一种由抗生素和蛋白质补充剂组成的特殊溶液混合并放入试管中,进行稀释。然后把试管放在离心机里,这是一台以极高的速度旋转的机器。当精子混合物被旋转时,精子细胞会沉降到试管的底部,产生大量密集的、高度活跃的精子。这些精子随后可以从试管中取出并用于合成受精卵。一个简单的精子清洗大约需要20到40分钟。
b. 精子上游法
在美国的IVF诊所里,精子上游法正变得越来越流行。这项技术围绕着这样一个理念:精子需要向前游,向上游才能到达子宫。只有最强壮的精子才能做到这一点。为了找到这个强壮的精子,精液被放在培养皿中,培养皿中有一层培养基。精子会被这种培养基吸引,并游向它。当精子游向培养液,实验人员将会把这些精子进行收集。这项技术需要大约两个小时来收集足够的精子用于合成受精卵。
c. 密度梯度离心法
这是目前诊所使用最多的洗精方法之一。密度梯度离心法利用了精液中各个成分沉降系数的不同,可以从取得的精液中分离出死去的精子细胞、白细胞和其他废物。精液首先将被放在媒介液体的最上层,试管在离心机中旋转。当它旋转后,活跃的、健康的精子会进入试管中最底部的液体层,而碎片和死去的精子会被夹在最上面的两层。为了从试管中取出活跃的精子,这些层可以被过滤掉。取得的健康精子随后被用于合成受精卵。使用密度梯度离心法洗涤精子大约需要60分钟。
洗精不仅可以筛选出最强壮、最具活力的精子,还可以去除存在于精液中间的病毒。例如:HIV、乙肝、丙肝、梅毒等。目前美国的精子洗涤技术已经相当成熟,精子不携带任何的传染性病毒的概率几乎可以达到99%。因此,在辅助生殖的过程中,精子洗涤是非常重要的一个环节,这不仅可以提取出最健康的精子,又能避免一些遗传疾病的延续,从而提高授精率,达到优生优育的目的。
通过洗涤和筛选的精子样本将会被转移到放卵子培养皿中,进行授精。
2. 授精
授精的方法有两种:常规授精和ICSI(卵母细胞浆内单精子注射)
- 常规授精:即是将精子和卵子混合在一起,让他们自然授精。这个方法适用于精子质量高,数量较多的男性。
- ICSI卵母细胞胞浆内单精子注射:我们将选择一颗单精子,在高倍显微镜的观察下,使用玻璃针管固定卵子,将精子注射入卵子内部,进行授精。最后放入培养箱中进行培育。这个方法适用于精子数量不佳,或是担心自己质量不够好的男性。
ICSI 单精子显微注射——版权属于FST诊所
这一操作将在取卵当日完成,这也被称为是胚胎培养的第0天。
3.胚胎培养
胚胎完成授精之后,将被放入专门的胚胎孵化器中,继续培养。
取卵后的第二天,即胚胎发育的第1天,也是确认授精的日子。
在早上,胚胎学家将评估精子和卵子DNA,取得卵子该日的生长结构,从而确认是否正常授精。
诊所的护理协调员会在当天打电话告知病人有多少卵子成功授精。
在这之后,胚胎学家们会将胚胎放入特殊的媒介当中持续培育这些胚胎,直到胚胎发育的第5-6天。媒介中包含了所有胚胎发育过程中所需要的营养物质。
通常一颗健康的胚胎,发育到第三天,应该可以分裂出6-8颗细胞,而且大小一致。
发育到第五至第六天,胚胎可以达到囊胚状态。囊胚状态是比较难到达的。这时,胚胎将拥有超过100颗以上的细胞,我们可以从这些显微照片中清楚的分辨出宝宝以及胎盘。
胚胎学家将会在胚胎发育的第3天以及第5-6天评估胚胎发育的情况,并打电话告知患者。
4. PGS/PGD
在胚胎发育到囊胚状态的时候,患者可以选择是否将胚胎送去进行PGS/PGD筛查,以确保这将是一个健康的宝宝,提高着床的成功率。
这一天,我们的胚胎学家将用针管固定住胚胎一侧(避开宝宝的细胞组织),用另一根针管吸取囊胚外层细胞(胎盘部位)的3-4颗细胞,进行切割,并制作成切片样本,送去专门的PGS实验室进行检验。
PGS是移植前染色体筛查,是对23条染色体进行分析,某条染色体上是否有平衡易位,单倍体,三倍体等,避免染色体变异造成得胎停等问题。
PGD是移植前基因诊断,主要是对已知的家族性基因基因遗传疾病进行基因诊断,如果没有疑似的家族遗传疾病就不需要做PGD。
通常如果没有家族遗传病史的患者家庭,只需要进行PGS即可。
PGS和PGD做完就可以知道宝宝性别!
PGS(染色体筛查)异常的胚胎,我们这里是绝对不会植入的!染色体异常的胚胎,不仅是成功率低,还极有可能对孕妇造成很大的妊娠风险,就算能成功生产,宝宝也极有可能存在缺陷。如果医生在明知胚胎有染色体异常,还为病人进行了植入,一旦病人由于染色体胚胎异常的因素,导致身体健康受到危害,进行起诉,医院将承担难以估计的风险。所以通常诊所都不会这么做。
5. 胚胎冷冻
在胚胎完成切片的同时,整个胚胎将被冷冻.
Part 2 胚胎如何冷冻和解冻
每个诊所的规定不同,在FST,我们的常规操作是所有的胚胎需达到囊胚状态,才能进行冷冻。囊胚状态的胚胎即培育了5-6天的胚胎。
囊胚状态下的胚胎,拥有了超过100颗以上的细胞,这时候的细胞非常的小,所以会较容易冷冻。FST采用的是目前最先进的玻璃化冷冻法(Vitrification),这是一种非常快速的冷冻方法。
我们会使用特殊的高浓度的冷冻保护剂,在极短时间内替换掉细胞内的水分并达到平衡。这时,细胞由于脱水而体积缩小到原体积的50-70%。然后将胚胎放入液态氮中,进行快速降温(约2000℃/分钟),使细胞呈现介于液体和固体之间、一种不规则类、似玻璃的状态。
玻璃化冷冻法可以有效的防止任何冰晶的生成,胚胎在这个过程中不会有任何损害,从而获得非常高的着床率和活产率。
冷冻后的胚胎,将会在零下196℃的液氮冷藏罐中保存,并可以无限期的储存下去。
胚胎解冻的方式也是相同的。非常的快速,不会对胚胎造成任何的伤害。
Q&A——常见问题:胚胎的等级如何定义
在美国,定义胚胎的等级,通常有两个不同的体系:
- 一个是培育3天的胚胎,即3日胚胎(Day 3 Embryo)
- 一个是培育5/6天的胚胎,也就是囊胚(Blastocyst )
三日胚胎评级 —— Day 3 Embryo
对于培育3天的胚胎评级,这个相对比较简单。我们通常会根据细胞的数量来进行评级。
3日胚胎的分数是从1到5,1是最好的分数,5是最差的分数。
1分的三日胚胎,会拥有6-8颗细胞,每一颗细胞都是同样的大小,胚胎内部有任何的碎片。这也是最理想的胚胎状态。
5分的胚胎,只有少于6颗的细胞,也许是3颗细胞,或是根本没有细胞。胚胎四周有许多的碎片。这个等级的胚胎,通常都会因为无法继续发育而直接被淘汰掉。
囊胚评级 —— Blastocyst
就我所在的诊所,我们通常都会移植囊胚,囊胚也是我们唯一会冷冻和解冻的胚胎。因此最重要的就是对囊胚进行评级。
针对囊胚,我们会通过观察细胞的密度,来评估囊胚腔内部的细胞——也就是将会发育成宝宝的细胞;囊胚腔外部的细胞——将会发育成为胎盘的细胞;以及囊胚腔。根据细胞分裂的情况,以及囊胚腔中碎片的比例,共有3个评级标准,分别是:
- 宝宝——内细胞团(Inner Cell Mass —— ICM)
- 胎盘——滋养细胞层(Trophoblast —— TE)
- 囊胚腔(Blastocele)
等级从A到F,A是最好的,F是最差的。
A级的胚胎,有非常多的宝宝细胞,非常多的胎盘细胞,和干净无杂质的囊胚腔。
F级的胚胎,没有任何的宝宝细胞,只有极少的胎盘细胞,没有或是只有非常小的囊胚腔。
胚胎的等级越高,当然成功率也会更高。FFF级别的胚胎,并不意味着就不能发育成一个健康的宝宝,只是概率更低。至少在FST,我们有过植入低分胚胎,并成功着床诞生的先例。
Q&A——常见问题:鲜胚 OR 冻胚
我们应该移植鲜胚还是冻胚?答案非常简单!我们应该尽量选择移植冻胚!因为冻胚的着床率,以及妊娠率更高!
- 鲜胚是指培育了3天的胚胎,这时候的正常胚胎,结构非常简单,大概有6-8颗细胞,无法进行PGS/PGD筛选,也无法得知性别。
- 冻胚通常是指囊胚,也就是培育了5-6天的胚胎。这时候胚胎已经具备宝宝和胎盘的雏形,拥有100颗以上的细胞,结构稳定,可以切取3-4颗外周滋养层细胞进行PGS/PGD, 进而筛选出最健康的胚胎,避免遗传病,并获知宝宝性别。
不论是鲜胚,还是冻胚,患者使用的促排药物都是相同的,区别在于鲜胚移植,是让患者的子宫内膜以一种更自然的方式来接手胚胎。鲜胚移植同样会有很好的妊娠率,但患者有可能会出现例如孕酮过高,子宫内膜厚度不够好等问题,因此着床率会较低。 患者也许需要增加移植胚胎的数量来获得好孕,但这同时,也曾加了妊娠的风险。
冻胚移植,需要再进入一个FET疗程(Frozen Embryo Transfer)也就是胚胎冷冻、解冻、移植的过程。在这期间,患者需要在下一个月经周期到来后,给诊所打电话,确认开始服用口服避孕药,并按照制定疗程计划,以及实验室测试结果进行用药,让子宫内膜的厚度达到8mm、并补充注射一定剂量的黄体酮,让子宫达到最适宜胚胎着床的环境水平。这段时间,也可以让患者在经历了促排取卵之后,有至少一个月的时间,好好休息,调理好身体循环,让患者身心都能做好准备迎接孕育一个宝宝。
过去的问题是,冷冻和解冻胚胎的技术并不够好,但是如今,就我们的实验室来说,已经可以100%保证胚胎的存活率。
因此基于100%的冻胚存活率,冻胚和鲜胚的质量是一样的,我们可以完全用冻胚替代鲜胚,以达到更高的成功率,让患者拥有一个理想的健康宝宝。
Q&A——常见问题:Day 3 OR Day 5
这个问题其实和上一个问题类似。至少在我们诊所,可以直接理解为:
Day 3 = 培育3天的胚胎 = 鲜胚
Day 5 = 培育5-6天的胚胎 = 囊胚 = 冻胚
答案不言而喻了吧! 选择Day 5,囊胚植入,成功率更高!
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祝愿大家都能有一个健康的宝宝~~
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最新评论 132
:请问我这个蘘胎等级 怎么看
:月经来了就可以进行冷冻胚胎移植吗?
:要看你的身体情况是否准备好
:请问你们是实验室还是医院,方便留个医院地址和咨询电话吗?
:是医院,有自己的实验室。名字是:Fertility Specialists of Texas。你可以Google到信息,直接打电话就行。
:亲,你好!我想问一下当初你注射孕酮的时候臀部有硬块怎么处理?我的针都打不进去,痛死我了
:只能多按摩,热敷,找没有硬块的地方打。针一定要扎进去足够深才能到肌肉层,不然脂肪层是没办法吸收药物的,就会变成硬块发炎。
:非常感谢楼主的分享,无论是IVF的经历还是这篇讲胚胎的,都好详尽呀。看了你的帖子,我才有勇气开始做IVF。现在第一次取卵,取了6颗,6颗熟,5颗成功受精,但是没有一颗走到囊胚day5. 这种情况在你们那里的案例中常见吗?我今年33,所有指标都正常,老公的精子质量也很好,不知道到底怎么回事,感觉非常沮丧。
:一般折损率都挺高的,几乎是50%,50%地砍掉。比如如果取卵20颗,能走到day3的大概10颗,能走到day 5的5颗,然后送去PGS/PGD,最后根据年龄,35岁以下一般有90%左右的正常概率,那可能就能有3-4颗是正常的。当然也有人是5颗全都不正常的,感觉这就跟精卵的质量有关了。话说你的医生给你的用药是怎样的情况?最终只取了6颗卵,感觉有点少啊……
回复 @ko526:没有再去别家,后来医生给我使用了生长激素,促排阶段最后几天使用了centrotide最后取8,熟7,受精卵6个,成功养囊3颗,现在女儿已经出生,希望这个信息对你有帮助。
:你好,请问冷冻的胚胎可以做染色体筛查吗?
:大概多少钱一次?
:具体要看你做什么项目了。//@Michellep2019: 大概多少钱一次?
:在Boston有推荐做试管婴儿的医院吗?这里挺多的也不知道该选哪个,因为自费所以谨慎点,谢谢啦
:应该都差不多,每一家做的案例都挺多的,你看看离你家近,选个review 高一些的医生,应该就没问题了。自费的话,可以跟医院问问有没有什么优惠。//@fannyxie: 在Boston有推荐做试管婴儿的医院吗?这里挺多的也不知道该选哪个,因为自费所以谨慎点,谢谢啦
:另外还想问一下,我看底下有个妹纸也问到了mini ivf,我看说好像针对AMH值比较低的人,是不是如果AMH值低于多少的话,也会影响ivf的成功率呀?楼主知道一般ivf诊所对AMH值有要求吗?谢谢!
:mini ivf,就是价格比较便宜的一种,日本比较流行。美国做的还是比较少,这边的医生,还是推崇一次尽量多取一些,这样能用的多。如果amh实在太低,低于0.5以下吧,很可能正常的ivf药打进去,都没有卵泡发育,周期只能取消,但是这个时候尝试mini,也不一定游泳。因为大剂量药都没反应,怎么可能保证小计量的药物,就会有反应,卵泡会长呢。//@onlytime: 另外还想问一下,我看底下有个妹纸也问到了mini ivf,我看说好像针对AMH值比较低的人,是不是如果AMH值低于多少的话,也会影响ivf的成功率呀?楼主知道一般ivf诊所对AMH值有要求吗?谢谢!
回复 @onlytime:通常不会,但是确实如果促排刺激过后,卵巢需要一个恢复期,可能fsh会增高,cyst的可能性会增大。amh是卵巢储备,相对来说跟年龄关系最大,跟取卵手术没什么关系。取卵是废物利用,把本来这个月会损失掉的卵子给用起来。不会对amh数值造成很大变化。//@onlytime: 明白了,不知道你有没有听说过做ivf对AMH值会有什么影响吗,或者说对卵子储备数量有影响吗?有些人说会导致AMH值降低很多,有些人取的卵子本身就是如果不取自己也会萎缩的卵子,所以没有影响,不知道哪种说法有道理
:我也打算第二次试管,不过我换了医生
:同样
:楼主,你好,我想问问?移植后,要不要躺在床上呢?还有有没有什么饮食建议呢,谢谢🙏
回复 @onlytime:可以上班的,只是后期不要有剧烈运动,不要提重物之类的。取卵当天肯定不能上班,取卵第二天,最好也在家休息一下。如果你取的卵子多,那么可能从取卵后第2-3天开始,会有腹胀 腹痛的反应,需要一个礼拜时间可以完全缓解。//@onlytime: 请问一下影响上班吗,不需要卧床休息的话是不是可以正常工作,不需要请假呢?除了这个阶段,在整个过程中,有需要在家静养几天,不能上班的时候吗?谢谢。
:不用的,可以走动,可以坐,不要剧烈运动就行。饮食清淡即可,主要是用了黄体酮容易便秘,所以多吃蔬菜粗纤维食物。//@ZOE917: 楼主,你好,我想问问?移植后,要不要躺在床上呢?还有有没有什么饮食建议呢,谢谢
:我目前接近39岁, 35岁自然怀孕, 有一个宝宝, 38岁尝试再次怀孕,试了半年都不成功,决定进行IVF。 第一次促排取了11颗卵子,8 个形成胚囊,PGS 结果5个abnormal, 1个high mosaic, 2个结果未知。 请问通常是什么情况会引起PGS结果未知?很拍促排全军覆没?调整饮食的话,多久会有效?网上说fish oil, melatonin, COQ10 可能有效,需要促排前提前多久开始吃的
:PGS结果未知,这个我没听说过呀,有可能是不是实验室Biopsy失败了,没切到完好的细胞。如果是这样,那么就是实验室的失误了。不过他们应该不会直接跟你这么说。保健品,促排前吃上就行,也不是神药,不是每个人都有作用的。成功率 主要还是取决于你自己的卵子质量,医生给你的方案是否最适合你的身体情况。//@ripplezh: 我目前接近39岁, 35岁自然怀孕, 有一个宝宝, 38岁尝试再次怀孕,试了半年都不成功,决定进行IVF。 第一次促排取了11颗卵子,8 个形成胚囊,PGS 结果5个abnormal, 1个high mosaic, 2个结果未知。 请问通常是什么情况会引起PGS结果未知?很拍促排全军覆没?调整饮食的话,多久会有效?网上说fish oil, melatonin, COQ10 可能有效,需要促排前提前多久开始吃的
:Q10主要是保护卵巢。你才38岁,按道理不至于全军覆没,可能是驱虎的卵子质量不够好,建议你问问实验室,是不是卵子本身的问题。他们应该有报告的。这个主要还是要看医生的方案以及你自己的身体状况。食物只是帮助你身体健康而已。//@ripplezh: 我目前接近39岁, 35岁自然怀孕, 有一个宝宝, 38岁尝试再次怀孕,试了半年都不成功,决定进行IVF。 第一次促排取了11颗卵子,8 个形成胚囊,PGS 结果5个abnormal, 1个high mosaic, 2个结果未知。 请问通常是什么情况会引起PGS结果未知?很拍促排全军覆没?调整饮食的话,多久会有效?网上说fish oil, melatonin, COQ10 可能有效,需要促排前提前多久开始吃的
:取卵22个,配了19个成熟的卵子陪,受精14个,前三天有八个分裂,到了第五天才有一个3Ac的胚胎,检查PGs染色体不正常。先生精子正常,这难道是我的卵子问题吗?如果是的话为什么还可以取出这么多个卵,而且受精后五天都还不错,到了后来全部都不好了呢
回复 @欣然接受:39岁确实高质量卵子不多了,通常35岁以下,5颗卵子会有大概2颗左右胚胎。所以39岁一次促排能有2颗左右胚胎就还不错了哦。
:这个概率确实很意外,卵子质量取决于年龄而不是数量,你年纪有多大?通草胚胎质量取决于卵子,你之前做过自身的染色体筛查吗?
:你好,我想问一下取卵后月经提前,可以在当个月进行冻囊胚移植吗?
:可以的~ 只要正常来月经了,就没问题,可以进入移植周期。
:想问一下如果有胚胎发育到day 5 还没个结果,说是要等到day 6. 这种情况是不是说明胚胎发育的不好? Day 6 也没啥希望了?
回复 @Theresa19:染色体这个问题比较随机的,有可能是本身卵子和精子的质量不好,导致染色体异常。例如精子,需要3个月的时间才会完成一次大更新,所以戒烟戒酒需要提前3个月。我觉得你卵子挺多的。你记得当时授精的卵子多吗? 还是培育到第5天就突然减少了?//@Theresa19: 我们之前有查过都没有问题啊。我先生在取卵前一个月都没有抽烟喝酒。我36岁,难道卵子质量这么差,那这次也取卵16个,day 5有3个。你说是不是injection plan不够好导致卵子没有完全成熟,看pgs报告都是染色体缺失不是多出一条那种
回复 @Theresa19:你和你先生有查过你们自己的染色体情况吗 例如染色体核型分析。如果你们都正常,但是胚胎却过不了PGS,那么可能是胚胎本身质量的问题。例如你先生有没有抽烟喝酒,你自己年龄。因为这些都是会造成胚胎染色体异常的因素。你的情况,可能需要多取一些卵子合成胚胎,这样机会大一些。外形评级不重要,PGS是关键。//@Theresa19: 请问楼主我两次ivf cycle 只有四个评级BBC的囊胚,结果全没通过PGS,这正常吗?什么原因造成这样?
:是药三分毒,我不想用很多药,害怕side effects
:美国的促排药你可以放心,因为几乎和我们自身分泌的激素一模一样,疗程结束后来一次月经就代谢掉了。 反而微促,需要重复多次取卵,才会成功。多次取卵,还需要多次麻醉,不停用取卵针刺破阴道壁,到达卵巢取卵。我觉得这样反而会恢复的比较慢。
回复 @cynthiamoon7:谢谢Po主
:谢谢po主🙏, 那mini ivf 在在加州,成功率挺高的。但不是SART member. 我有点担心他们的lab 不够好. 也有一个clinic 是START 也提供mini IVF,但是我不符合他们的标准。所以很纠结
:你为什么要做mini IVF吗?美国做微促的诊所很少啊,加州我之前也有听说过,但是确实,这个没办法统计成功率,因为需要做很多次才会成功,所以成功率是低的,没办法统计。你为什么要做微促,不直接做IVF呢?//@seapearl61: 谢谢po主, 那mini ivf 在在加州,成功率挺高的。但不是SART member. 我有点担心他们的lab 不够好. 也有一个clinic 是START 也提供mini IVF,但是我不符合他们的标准。所以很纠结
:你好Po 主👋, 谢谢你的详尽介绍 Ivf. 看了你的三篇文章收益良多!我跟老公 想做mini IVF。 你对mini IFV 有什么看法?还有哪牌子的Q10好?什么时候开始吃?男女都吃吗?谢谢🙏
:Q10 备孕就可以开始吃,一天200mg即可,男女都吃。牌子无所谓,超市开架的都可以。 mini IVF 我个人感觉美国做的不多,所以我并不太了解,如果你有相关问题的话,我可以帮你去问。
:楼主好,老公第一次精液检查无精子,请问你们所这方面处理的多吗?休斯顿有你们分部门吗?
回复 @小owl北美Gogo购:我看了看病例数和成功率, Houston IVF, Houston Fertility Institute, Center of Reproductive Medicine 都还可以 ,你看看哪家离你家近吧,促排期间常常要去抽血,休斯敦的交通还是挺折腾的。加油💪
:有遇到这个情况。通常就是找找看是什么原因引起的,调理一下身体。如果不严重的话,可能就会要求多取几次精子冷冻,或者做睾丸钢针穿刺取得精子。严重的话,我们会referral先生去看urologist,看能不能通过治疗改善。
:亲爱的楼主,你第二次取卵,为了男宝宝,两个人的饮食怎么改变的呀?
:女生就还是多吃蛋白质,让卵泡长的好,戒辛辣刺激的食物,以及甜食,预防腹胀。男方就是多吃蔬菜,少吃红肉,多吃香蕉葡萄,让身体环境呈碱性。这个方面的论文很少,但是这个算是我自己经历过的一个经验吧。可能每个个体也有差异,不一定。不过做到了,至少之后也不会后悔。//@Avaluo: 亲爱的楼主,你第二次取卵,为了男宝宝,两个人的饮食怎么改变的呀?